
KingFisher技术用于纯化DNA、RNA、蛋白质和细菌、细胞,其有优越的速度和准确性,在纯化阶段使用转移磁珠的概念,获得极好的结果,无交叉污染和试剂挟带。适合小规模样本,一次运行24个样品;大规模样品,可处理通量达到96个样品,每个样品的zui大处理体积达5ml,是磁珠提取纯化系统的巅峰之作。
Thermo Scientific KingFisher磁珠提取纯化系统
KingFisher技术原理
磁珠提取金标准
KingFisher系列产品是适于分离DNA/RNA、蛋白和细胞的全自动提取系统,专为解决客户现在和未来的所有提取纯化问题而设计。产品基于KingFisher技术(专利号US 6447729,US 6448092),已经在磁珠提取领域形成新的行业金标准。通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠,从而实现磁珠/样品的转移,避免了液体处理过程,提高了自动化程度
KingFisher技术的工作原理如下图所示,样品、溶液和磁珠置于微孔板或管中,磁棒表面套有专门的磁套用于保护磁棒,避免其与样品/溶液/磁珠直接接触。磁棒的工作模式可以分为以下四种(以样品管为例):
1.收集磁珠:在磁珠收集过程中,磁棒完全插入磁套,与磁套一起在样品管中上下移动,混匀的磁珠被磁棒吸附在磁套的
下沿。完成收集的磁棒与磁套一起升起,等待转移至下一个位置。
2.释放磁珠:当完成磁珠的收集后,磁棒与磁套一起转移到下一个指定的样品管位置,准备释放磁珠。在释放过程中,磁
棒保持静止(高位),而磁套下降进入样品管(低位),这使得磁套下沿的被吸附的磁珠脱离磁棒的吸引,释放进入样
品管。磁套继续在溶液中上下运动,使磁珠在溶液中充分混合。
3.清洗磁珠:磁珠清洗是磁珠提取纯化中关键的一步。通过清洗,可以将那些与磁珠非特异性结合的杂质洗去,从而
提高产物的纯度。在清洗时,磁套下降进入溶液,而磁棒停留在上方,通过磁套的上下运动,使得磁珠在溶液中充分
混合。为了有效地实现清洗效果,可以选择不同的混合速度用于优化实验结果,如Bindlt软件支持5种不同的混合模
式,而且不同速度之间可以进行任意组合。此外,经优化设计的磁套,确保在磁头转移时没有任何挂液现象。
4.磁珠洗脱:经过清洗缓冲液处理的磁珠,通过磁棒转移至盛有洗脱液的样品管位置,进行洗脱,其过程与释放磁珠类
似。在洗脱过程中可以选择进行动能洗脱或孵育。动能洗脱是指通过磁套的上下运动,将磁珠与洗脱液充分混合接触,
配合孵育加速样品从磁珠上释放的过程。在洗脱时,通常采用小体积洗脱,如初始样品200l,洗脱液50l,这样通过洗脱,就可将样品浓缩4倍,从而提高产物的浓度。
KingFisher
20-200ul
1~24samples
KingFisher mL
50-1000ul
1-15 Samples
KingFisher DUO Prime
50-5000ul
1~24Samples
KingFisherFlex
20-5000ul
1-24/96Samples
KingFisher技术,转移磁珠而非转移液体,磁珠纯化的金标准。
适用于分离DNA/RNA、蛋白质和细胞。
开放的系统平台:所有的商业化的磁珠提取试剂盒均可使用。
产物纯度高,磁珠回收率高,尤其是痕迹量样本和非均相液体标本的得率非常好。
无交叉污染,可重复性好,可处理各种来源的标本,结果可靠。
速度快:15~30分钟完成一轮纯化,可同时纯化96个样品。
提取过程自动化。
快速高通量标准化
借助于KingFisher磁珠转移技术,KingFisher Flex系统可同时使用96根磁棒工作,15-30min内快速完成96份样品的提取纯化,不仅极大地提升实验工作效率,而且实现了实验室样品提取流程的标准化。
KingFisher样品提取方式
KingFisher技术,采用磁棒式转移磁珠,与传统的样品提取模式完全不同。浸入式磁棒通过在样品提取体系内提供磁场,直接吸附磁珠并高度聚集于磁棒末端,通过特异性磁珠获得高纯度样品,全程无需离心或抽真空。提取过程采用动能吸附和洗脱模式,洗脱体积及产物浓度可调。低吸附聚丙烯耗材,确保无磁珠残留,即使痕量样品的提取依然表现出色。
灵活的配置满足多种需求
KingFisher Flex主机可配置多种不同的磁头:兼容96深孔板和96浅孔板的KF96深孔板磁头、5ml工作体积的KF24深孔板磁头、小体系提取的KF96磁头以及使用PCR板的KF96PCR磁头。通过预设的磁头更换程序,用户可根据应用的需要,快速地切换不同的磁头,无需任何工具徒手即可完成。
卓越的稳定性和重复性
KingFisher Flex磁头的Z轴运动振幅、模式和强度参数均经过严格测试,工作位旋转和定位均经过优化,这使得磁棒在各样品孔中的位置与运动方式完全一致。特殊设计的磁套,以及针对不同工作体积优化的安全运动距离与方式,使得纯化过程中形成液封,确保孔间无气溶胶相互干扰。特制的磁棒,确保磁珠只吸附在磁棒末端,无孔间窜吸现象,避免样品间的交叉污染,确保样品提取的重复性和稳定性。
优化的三维加热模块
特别设计的深U型凹槽嵌套式加热模块,与KingFisher Flex提取板底部完美贴合,确保每孔底部及四周均匀受热,升温迅速,提高样品裂解与洗脱的效率。加热模块可根据提取程序的要求,在设定的控温步骤,如裂解或洗脱时,自动上升就位,而在无需控温的清洗步骤可自动卸载避免加热对清洗液中醇浓度的影响,从而实现灵活的控温。
图形化界面与控制面板
彩色LCD显示屏,图形化界面,多菜单切换,程序信息、运行状态和参数一目了然。简洁的控制面板,四方向键、START/PAUSE/STOP/OK和顺/逆时针按键,操作简易。多达512个程序的预置内存空间,分类管理各类应用,并可快速调用。
自由开放的平台
KingFisher Flex是一个开放的体系,不仅可以使用Thermo旗下包括Ambion、Dynal、KF Pure、LabServ以及Pierce五种品牌的磁珠试剂,还可兼容市场上其他品牌的进口和国产磁珠试剂,应用包括核酸提取、蛋白纯化、细菌富集等。用户可通过网络直接下载现有的各类应用程序,也可针对不同的应用,通过BindIt软件快速编辑程序。针对特殊样本的提取要求,灵活而强大的BindIt软件,可帮助用户 短时间内完成程序的优化,获得高质量的提取纯化结果。软件同时具备二维码扫描、样品信息管理、数据追溯、过程实时监控、故障报警及运行报告输出等功能。
无限的自动化升级
KingFisher Flex可与自动移液工作站(Liquid Handl ing), 如Hamilton、 Tecan等整合为一体化的磁珠工作平台,也可作为磁珠纯化单元,通过自动机械臂(Robotics),与其他外周设备,如荧光定量PCR、封膜机、工作站等构建轨道式机器人工作站,实现更高的通量和更强大的功能平台。